Aislamiento, cultivo y caracterización de líneas celulares embrionarias bovinas
- Autoría
- A. Rodríguez, P. Fisher, R. Alberio, E. Gómez, C. Díez, L.J. Royo, J.N. Caamaño, S. Pérez, K.H.S. Campbell
- Volumen
- 102-2 (185-191)
- Sección
- Producción animal
- Palabras clave
- Células troncales embrionarias, colonia, masa celular interna, blastocisto bovino.
- Resumen
El objetivo principal de este trabajo es el aislamiento, cultivo y caracterización de líneas embrionarias producidas a partir del aislamiento de masa celular interna (MCI) de blastocisto bovino. Las MCI se aislaron mediante inmunocirugía y se cultivaron en monocapas de fibroblastos embrionarios de ratón (MEF) mitóticamente inactivados. Tras 10-15 días de cultivo primario, las colonias surgidas se disgregaron, resembraron en una nueva MEF, y cultivaron por tiempo variable para tratar de obtener nuevas colonias. Tanto los cultivos primarios como los pases 2 y 3, así como las colonias supervivientes a la congelación, expresaron los marcadores de pluripotencia SSEA-4, TRA-1-60 y Oct4, y fueron positivos al test de la fosfatasa alcalina. A falta de pruebas para el diagnóstico de la pluripotencia y capacidad de autorrenovación, las células obtenidas presentan parte de las características de las células troncales embrionarias (ES-like).
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