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Aislamiento, cultivo y caracterización de líneas celulares embrionarias bovinas |
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Autores: | A. Rodríguez, P. Fisher, R. Alberio, E. Gómez, C. Díez, L.J. Royo, J.N. Caamaño,
S. Pérez, K.H.S. Campbell | Volumen: | 102-2 (185-191) | Tipo de Artículo: | Producción Animal | Palabras Clave: | Células troncales embrionarias, colonia, masa celular interna, blastocisto bovino. | Resumen: | El objetivo principal de este trabajo es el aislamiento, cultivo y caracterización de líneas embrionarias
producidas a partir del aislamiento de masa celular interna (MCI) de blastocisto bovino. Las MCI se aislaron
mediante inmunocirugía y se cultivaron en monocapas de fibroblastos embrionarios de ratón
(MEF) mitóticamente inactivados. Tras 10-15 días de cultivo primario, las colonias surgidas se disgregaron,
resembraron en una nueva MEF, y cultivaron por tiempo variable para tratar de obtener nuevas
colonias. Tanto los cultivos primarios como los pases 2 y 3, así como las colonias supervivientes a la congelación,
expresaron los marcadores de pluripotencia SSEA-4, TRA-1-60 y Oct4, y fueron positivos al
test de la fosfatasa alcalina. A falta de pruebas para el diagnóstico de la pluripotencia y capacidad de
autorrenovación, las células obtenidas presentan parte de las características de las células troncales
embrionarias (ES-like). |
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